摘 要: 對(duì)當(dāng)前的主流尿沉渣分析技術(shù)進(jìn)行了分析,,詳細(xì)說(shuō)明了基于圖像的識(shí)別分析技術(shù),并指出尿沉渣分析的重點(diǎn)與難點(diǎn),。此外,,還給出了分析標(biāo)準(zhǔn)化的建議,為各種不同分析儀之間進(jìn)行性能比較提供了參考,。
關(guān)鍵詞: 尿沉渣,;圖像處理;圖像分割,;標(biāo)準(zhǔn)化
尿液中含有一些肉眼看不到的具有重大臨床價(jià)值的微小結(jié)構(gòu),,并且數(shù)量很少。為了找到這些可能造成泌尿系統(tǒng)病變的物質(zhì),,只能借助一定的設(shè)備與技術(shù)來(lái)觀察和分析,,這就是尿沉渣分析。尿沉渣分析是用設(shè)備對(duì)尿液中有形成分的質(zhì)和量檢查的組合,,是比較重要的一項(xiàng)臨床檢驗(yàn)工作,,對(duì)腎和尿路疾患的診斷、疾病的嚴(yán)重程度及愈后的判斷都有極為重要的價(jià)值,。尿沉渣檢查中的尿沉渣計(jì)數(shù)檢查是對(duì)尿液中有形沉淀物的分類識(shí)別計(jì)數(shù),,根據(jù)一定時(shí)間內(nèi)一定量尿液中各種有形成分的種類和數(shù)量,了解腎和尿路健康情況,。目前,,在尿沉渣計(jì)數(shù)檢查方面,許多醫(yī)院仍采用人工識(shí)別的方法,,該方法實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單,、操作容易,但是勞動(dòng)強(qiáng)度大,、檢驗(yàn)速度慢且檢驗(yàn)結(jié)果受個(gè)人主觀因素影響較大,。基于以上原因,,需要一種快速,、客觀和統(tǒng)一的尿沉渣分析技術(shù)。近年來(lái),,計(jì)算機(jī)技術(shù)迅猛發(fā)展,,圖像處理得到深入研究和廣泛應(yīng)用,許多復(fù)雜算法可以較容易實(shí)現(xiàn),,因此完全可以將數(shù)字圖像處理技術(shù)與人類的經(jīng)驗(yàn)結(jié)合起來(lái),,實(shí)現(xiàn)尿沉渣有形成分的快速和自動(dòng)分析。
1 尿沉渣分析技術(shù)及特點(diǎn)
1.1 傳統(tǒng)的分析方法
由專門的檢驗(yàn)人員在顯微鏡下觀察尿沉渣涂片,,首先用低倍鏡觀察,,找出有無(wú)各種有形物體,,然后轉(zhuǎn)到高倍鏡仔細(xì)觀察確認(rèn)分類和計(jì)數(shù),該方法即為尿沉渣鏡檢,。尿沉渣鏡檢分析是對(duì)尿液染色涂片放大400倍或100倍時(shí)所看見(jiàn)有形成分的識(shí)別及計(jì)數(shù),,在此放大范圍,可以識(shí)別的成分有紅細(xì)胞,、白細(xì)胞,、上皮細(xì)胞、管形以及其他一些結(jié)晶和雜質(zhì),。檢驗(yàn)時(shí)要求觀察多個(gè)視野,,統(tǒng)計(jì)每一個(gè)視野下有形成分的種類和個(gè)數(shù)。但人為主觀因素對(duì)該檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)結(jié)果影響較大,,不同的檢驗(yàn)人員之間可能會(huì)使用不同的判別標(biāo)準(zhǔn),,導(dǎo)致檢查結(jié)果的差異,最后影響診斷結(jié)果,。此外,,采用人工觀察檢驗(yàn)的方法效率很低。此外,,還有采用在顯微鏡上加裝CCD攝像頭的方法,,將所觀察畫(huà)面經(jīng)過(guò)圖像采集卡輸入計(jì)算機(jī),,然后再顯示在屏幕上,,可以通過(guò)屏幕顯示來(lái)識(shí)別和計(jì)數(shù)有形成分,然后把分析結(jié)果和圖像通過(guò)打印機(jī)輸出,,同時(shí)也可以保存[1],。該檢驗(yàn)方法雖然使用了計(jì)算機(jī),但是實(shí)質(zhì)只是把圖像搬到計(jì)算機(jī)屏幕上而已,,并沒(méi)有利用計(jì)算機(jī)強(qiáng)大的處理能力和圖像處理技術(shù)來(lái)進(jìn)行識(shí)別,、計(jì)數(shù)和分析,因此仍是傳統(tǒng)的識(shí)別分析方法,。
1.2 非傳統(tǒng)的分析方法及特點(diǎn)
1.2.1 流式細(xì)胞術(shù)分析方法
流式細(xì)胞分析FCM(Flow CytoMetry)是以高能量激光照射高速流動(dòng)狀態(tài)下被熒光色素染色的單細(xì)胞或微粒,,測(cè)量其產(chǎn)生的散射光和發(fā)射熒光的強(qiáng)度,從而對(duì)細(xì)胞(或微粒)的物理,、生理,、生化、免疫,、遺傳,、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進(jìn)行定性或定量檢測(cè)的一種現(xiàn)代細(xì)胞分析技術(shù)。它具有如下幾個(gè)特點(diǎn):(1)標(biāo)本只要是單細(xì)胞即可用于分析,;(2)分析細(xì)胞速度極快,,只要標(biāo)本中的細(xì)胞數(shù)量足夠,,流式細(xì)胞儀(Flow Cytometer)能夠以每秒數(shù)十、數(shù)百,、數(shù)千個(gè)細(xì)胞的速率進(jìn)行測(cè)量,,測(cè)量的細(xì)胞總數(shù)可達(dá)數(shù)千、數(shù)萬(wàn)乃至數(shù)百萬(wàn)個(gè),;(3)可同時(shí)分析單個(gè)細(xì)胞的多種特征,,使細(xì)胞亞群的識(shí)別、計(jì)數(shù)更為準(zhǔn)確,;(4)定性或定量分析細(xì)胞,。已開(kāi)發(fā)出采用該技術(shù)的全自動(dòng)尿有形成分分析儀,如Sysmex UF-100,,其采用細(xì)胞術(shù)原理,,對(duì)未離心尿中有形成分的DNA、細(xì)胞膜進(jìn)行染色,,然后測(cè)量細(xì)胞的前向散射光和前向熒光兩種參數(shù),,應(yīng)用多參數(shù)算術(shù)法則直接計(jì)算和分析,可識(shí)別和計(jì)數(shù)尿液中紅細(xì)胞,、白細(xì)胞,、上皮細(xì)胞、管形及細(xì)菌5種有形成分[2-3],。流式細(xì)胞術(shù)是一種先進(jìn)的檢驗(yàn)方法,,但由于不是確證檢驗(yàn),只能用于早期的篩選,,具有一定的局限性,,在許多重要診斷場(chǎng)合,最終還是采用鏡檢,,因此流式細(xì)胞分析并不能夠完全代替尿沉渣鏡檢,。
1.2.2 基于圖像的分析方法
通過(guò)在顯微鏡上加裝一定的設(shè)備,就可以把尿沉渣圖像以一定格式輸入到計(jì)算機(jī)中,,從而可以運(yùn)用圖像處理的方法對(duì)尿沉渣圖像進(jìn)行分析處理,。根據(jù)尿液中各種有形成分的特點(diǎn),選擇合適的處理過(guò)程和處理算法,。利用計(jì)算機(jī)技術(shù)和模式識(shí)別相結(jié)合的方法來(lái)對(duì)尿沉渣中有形成分進(jìn)行分析,,可提高識(shí)別的質(zhì)量和速度。由于對(duì)所有的檢驗(yàn)樣本都采用統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),,在檢驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有人為主觀因素的影響,,因此可得到可信度更高的檢驗(yàn)結(jié)果供參考。同時(shí),由于采用適當(dāng)?shù)奶幚矸椒?,可以?duì)有形成分進(jìn)行自動(dòng)識(shí)別,、計(jì)數(shù),大大減少了人員的勞動(dòng)強(qiáng)度,。目前國(guó)內(nèi)外已在此基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)出不少基于圖像的尿沉渣分析儀,,如美國(guó)IRIS推出的Yellow IRIS及IQ-200,國(guó)內(nèi)推出的SQ-3000型全自動(dòng)尿沉渣分析系統(tǒng)以及天海US2020系列等,,但是實(shí)際的識(shí)別率以及自動(dòng)化程度還有待進(jìn)一步提高[4-6],。
2 基于圖像的尿沉渣分析
2.1 圖像采集、預(yù)處理
基于圖像的尿沉渣分析是將鏡檢與圖像處理技術(shù)相結(jié)合,,既具有鏡檢的確證性,,同時(shí)又利用了計(jì)算機(jī)強(qiáng)大的處理能力。通過(guò)在顯微鏡上加裝CCD攝像頭對(duì)光學(xué)圖像進(jìn)行光電轉(zhuǎn)換輸入圖像采集卡,,然后把圖像輸入計(jì)算機(jī),,接著對(duì)圖像進(jìn)行預(yù)處理,再采用各種合適算法進(jìn)行特征提取,,做出判斷,,如圖1所示。
2.2 分類識(shí)別計(jì)數(shù)處理
對(duì)所獲取的圖像進(jìn)行預(yù)處理得到二值圖像以后,,就可以運(yùn)用各種過(guò)程和算法對(duì)圖像進(jìn)行分割和識(shí)別,,在此過(guò)程中所采用的圖像分割與特征提取算法以及整個(gè)處理過(guò)程對(duì)最后的識(shí)別結(jié)果很重要。目前許多技術(shù)都被用到圖像處理識(shí)別中,,如神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),、遺傳算法、支持向量機(jī),、免疫算法等,,并且都獲得了一定的效果[7-13],。識(shí)別處理是整個(gè)分析系統(tǒng)最重要和關(guān)鍵的部分,,最終識(shí)別率的高低以及自動(dòng)識(shí)別程度主要由此決定,最后按一定的標(biāo)準(zhǔn)形式保存和輸出處理結(jié)果,。
3 尿沉渣圖像分析儀
圖像分析儀又稱圖像分析系統(tǒng)(Image Analysis System),,主要用來(lái)解決如何客觀地、較精確地用數(shù)字來(lái)表達(dá)存在于標(biāo)本中的各種信息,,它已經(jīng)成為一種實(shí)用有力的科學(xué)研究工具,,并且在逐漸展現(xiàn)出巨大的潛能。圖像中包含著極其豐富的內(nèi)容,,是人們從客觀世界中獲得信息的重要手段,,因此,正確地處理圖像從而獲取有用信息已成為圖像處理技術(shù)中的重要課題。
3.1 尿沉渣圖像分析儀硬件部分構(gòu)成
尿樣本經(jīng)過(guò)染色,、涂片后放在顯微鏡下,,調(diào)焦至最清晰狀況,然后由CCD將此時(shí)圖像轉(zhuǎn)換為電信號(hào)輸入到圖像采集卡,,再由圖像采集卡將圖像的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為數(shù)字圖像輸出至計(jì)算機(jī),,最后經(jīng)過(guò)處理的圖像和各種處理結(jié)果一同輸出到輸出裝置,如圖2所示,。
4 分析標(biāo)準(zhǔn)化
目前許多已開(kāi)發(fā)出來(lái)的尿沉渣分析儀所標(biāo)稱的識(shí)別率雖然很高,,但都是在使用特殊圖片處理下得到的結(jié)果,不具有廣泛性和可比性,。因此可以對(duì)采用各種不同算法,、不同廠家生產(chǎn)的尿沉渣分析儀性能的對(duì)比判斷有一個(gè)統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。分析標(biāo)準(zhǔn)化包括:(1)對(duì)尿液收集的規(guī)范,、何時(shí)收取以及收集量的多少,、是否離心以及使用多大的玻璃片來(lái)制作沉渣涂片作出規(guī)定;(2)制定出檢驗(yàn)用的標(biāo)準(zhǔn)圖像庫(kù),;(3)對(duì)識(shí)別計(jì)數(shù)結(jié)果表示的標(biāo)準(zhǔn)化,。
本文對(duì)尿沉渣分析的原理及目前所采用的技術(shù)特點(diǎn)進(jìn)行了歸納,重點(diǎn)介紹了基于圖像的尿沉渣有形成分識(shí)別計(jì)數(shù)方法,,對(duì)基于圖像處理方法研制的尿沉渣分析儀進(jìn)行了說(shuō)明,,同時(shí)指出對(duì)尿沉渣分析標(biāo)準(zhǔn)化的重要性。雖然目前已開(kāi)發(fā)出不少尿沉渣分析儀,,但是在識(shí)別率及自動(dòng)識(shí)別程度上還不是很讓人滿意,,仍還有許多問(wèn)題有待解決。
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